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分光光度值與核酸濃度的換算
1 A260 unit dsDNA=50 μg/ml
1 A260 unit ssDNA=33 μg/ml
1 A260 unit ssRNA=40 μg/ml
蛋白質質量與摩爾數(shù)的轉換
100 pmol的100 kDa蛋白分子=10 μg
100 pmol的50 kDa蛋白分子=5 μg
100 pmol的10 kDa蛋白分子=1 μg
100 pmol的1 kDa蛋白分子=100 ng
DNA分子質量與摩爾數(shù)
1 μg of 1000 bp DNA = 1.52 pmol(3.03 pmol of ends)
1 μg of pBR322 DNA = 0.36 pmol DNA
1 pmol of 1000 bp DNA = 0.66 μg
1 pmol of pBR322 DNA = 2.8 μg
蛋白質/DNA之間的轉換
1 kb的DNA可編碼333個氨基酸=37 kDa的蛋白分子
270 bp的DNA= 10 kDa的蛋白分子
9個氨基酸=1 kDa的蛋白分子
810 bp的DNA= 30 kDa的蛋白分子
2.7 kb的DNA= 100 kDa的蛋白分子
DNA分子質量與摩爾數(shù)的換算公式
對于dsDNA 分子
將pmol轉換為μg
pmol×N×(660 pg/pmol)×(1 μg/106pg) = μg
將μg轉換為pmol
μg×(106pg/1 μg)× (pmol/660 pg)×(1/N) = pmol
其中 N 是核酸堿基對數(shù),660 pg/pmol 是每對堿基的平均分子量(MW)。
一個氨基酸的平均分子量=100 Daltons(道爾頓)
Daltons(Da) kilo是原子質量單位的另一名稱,千道爾頓
Dalton (kD)即為1000 道爾頓 。因此,質量為46 kD的蛋白質是每摩爾分子46000克的分子。
對于ssDNA 分子
將pmol轉換為μg
pmol×N×(330 pg/pmol)×(1 μg/106pg) = μg
將μg 轉換為pmol
μg×(106pg/1 μg)×(pmol/330 pg)×(1/N) = pmol
其中 N 是核酸堿基數(shù),330 pg/pmol 是每個堿基的平均分子量(MW)。
同位素, 酸、堿, 蛋白質數(shù)據(jù)
(Isotope Data, Acids & Bases, Protein Data)
同位素數(shù)據(jù)
|
同位素 |
釋放的微粒 |
半衰期 |
|
14C |
b |
5,730 years |
|
3H |
b |
12.3 years |
|
125I |
g |
60 days |
|
32P |
b |
14.3 days |
|
33P |
b |
25 days |
|
35S |
b |
87.4 days |
|
1 Ci |
= |
1,000 mCi |
|
1 mCi |
= |
1,000 μCi |
|
1 μCi |
= |
2.2 X 106 disintegrations/minute |
|
1 Becquerel |
= |
1 disintegration/second |
|
1 μCii |
= |
3.7 X 104 Becquerels |
|
1 Becquerel |
= |
2.7 X 10-5 μCi |
酸、堿
|
酸或堿 |
分子式 |
分子量 |
比重 |
質量百分比 |
C克分子濃度 |
|
冰醋酸 |
CH3COOH |
60.0 |
1.05 |
99.5 |
17.4 |
|
甲酸 |
HCOOH |
46.0 |
1.20 |
90 |
23.4 |
|
鹽酸 |
HCl |
36.5 |
1.18 |
36 |
11.6 |
|
硝酸 |
HNO3 |
63.0 |
1.42 |
71 |
16.0 |
|
高氯酸 |
HClO4 |
100.5 |
1.67 |
70 |
11.6 |
|
磷酸 |
H3PO4 |
98.0 |
1.70 |
85 |
18.1 |
|
硫酸 |
H2SO4 |
98.1 |
1.84 |
96 |
18.0 |
|
氫氧化氨 |
NH4OH |
35.0 |
0.90 |
28 |
14.8 |
|
氫氧化鉀 |
KOH |
56.1 |
1.52 |
50 |
13.5 |
|
氫氧化鈉 |
NaOH |
40.0 |
1.53 |
50 |
19.1 |
|
β-巰基乙醇 |
HSCH2CH2OH |
78.1 |
1.11 |
100 |
14.3 |
蛋白質
菌種: E. coli 或 Salmonella typhimurium
|
細胞 |
每個細胞 |
每升培養(yǎng)體系(109細胞/ml) |
|
濕重 |
9.5 X 10-13 g |
0.95 g |
|
干重 |
2.8 X 10-13 g |
0.28 g |
|
總蛋白 |
1.55 X 10-13 g |
0.15 g |
|
體積 |
1.15 μm3 = 1 femtoliter |
|
|
每個細胞中的蛋白濃度: 135 mg/ml |
||
|
1升培養(yǎng)體系(109細胞/ml)中所產(chǎn)生的目標蛋白的理論值: |
||
核苷酸的物理特性
(Nucleotide Physical properties)
|
核苷酸 |
分子量 |
吸收波長λ max (pH 7.0) |
在λ max 處的吸光度 |
|
ATP |
507.2 |
259 |
15,400 |
|
CTP |
483.2 |
271 |
9,000 |
|
GTP |
523.2 |
253 |
13,700 |
|
UTP |
484.2 |
262 |
10,000 |
|
dATP |
491.2 |
259 |
15,200 |
|
dCTP |
467.2 |
271 |
9,300 |
|
dGTP |
507.2 |
253 |
13,700 |
|
dTTP |
482.2 |
267 |
9,600 |
核酸數(shù)據(jù)
(Nucleic Acid Data)
一個DNA堿基對(鈉鹽)的平均分子量 = 650 道爾頓
1.0 A260 unit ds DNA = 50 μg/ml = 0.15 mM (in nucleotides)
1.0 A260 unit ss DNA = 33 μg/ml = 0.10 mM (in nucleotides)
1.0 A260 unit ss RNA = 40 μg/ml = 0.11 mM (in nucleotides)
雙鏈DNA分子的分子量(道爾頓) = 堿基對數(shù)目×650
雙鏈DNA分子的末端摩爾數(shù) = 2 ×DNA質量(克)/ DNA分子量(道爾頓)
限制性內切酶酶切后的DNA末端摩爾數(shù):
a) 環(huán)狀DNA分子: 2 × DNA摩爾數(shù)× 位點數(shù)
b) 線性DNA分子: 2 × DNA摩爾數(shù)×位點數(shù) + 2 × DNA摩爾數(shù)
1 μg 1000 bp DNA = 1.52 pmol = 9.1 × 1011 molecules
1 μg pUC18/19 DNA (2686 bp) = 0.57 pmol = 3.4 × 1011 molecules
1 μg pBR322 DNA (4361 bp) = 0.35 pmol = 2.1 × 1011 molecules
1 μg M13mp18/19 DNA (7249 bp) = 0.21 pmol = 1.3 × 1011 molecules
1 μg λDNA (48502 bp) = 0.03 pmol = 1.8 ×1010 molecules
1 pmol 1000 bp DNA = 0.66 μg
1 pmol pUC18/19 DNA (2686 bp) = 1.77 μg
1 pmol pBR322 DNA (4361 bp) = 2.88 μg
1 pmol M13mp18/19 DNA (7249 bp) = 4.78 μg
1 pmol λDNA (48502 bp) = 32.01 μg
1.0 kb DNA = 333個氨基酸的編碼量≈ 37,000 道爾頓蛋白質
10,000道爾頓蛋白質≈270 bp DNA
50,000道爾頓蛋白質≈ 1.35 kb DNA
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