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      Western Blot

      Western免疫印跡(Western Blot)是將蛋白質轉移到膜上,然后利用抗體進行檢測的方法。對已知表達蛋白,可用相應抗體作為一抗進行檢測,對新基因的表達產物,可通過融合部分的抗體檢測。

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      Western免疫印跡(Western Blot)是將蛋白質轉移到膜上,然后利用抗體進行檢測的方法。對已知表達蛋白,可用相應抗體作為一抗進行檢測,對新基因的表達產物,可通過融合部分的抗體檢測。


      與Southern或Northern雜交方法類似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳,被檢測物是蛋白質,“探針”是抗體,“顯色”用標記的二抗。

      經過PAGE分離的蛋白質樣品,轉移到固相載體(例如硝酸纖維素薄膜)上,固相載體以非共價鍵形式吸附蛋白質,且能保持電泳分離的多肽類型及其生物學活性不變。以固相載體上的蛋白質或多肽作為抗原,與對應的抗體起免疫反應,再與酶或同位素標記的第二抗體起反應,經過底物顯色或放射自顯影以檢測電泳分離的特異性目的基因表達的蛋白成分。該技術也廣泛應用于檢測蛋白水平的表達。

      服務內容: 
      1. 從細胞、人或動物組織、細菌、植物、血清等樣品中提取蛋白 
      2. 對蛋白進行定性及定量分析 
      3. Western blot檢測 :
           (1) 電泳:聚丙烯酰胺凝膠(SDS-PAGE)分離蛋白樣品 
           (2) 濕法轉印 
           (3) 雜交:用抗體鑒定膜上的特定蛋白
           (4) 化學發(fā)光檢測(ECL),膠片曝光,ImageJ軟件讀取灰度值(可選) 
      4. 預實驗及正式實驗:幫助客戶設計樣品上樣順序 
      5. 免費進行胞漿蛋白內參檢測(胞核蛋白內參需收取費用) 

      送樣要求:
      1. 細胞>1×107,組織>50mg,細菌濕重>50mg,植物>100mg,血清>50ul;
      2. 樣品蛋白濃度>1mg/ml,蛋白量>200ug/樣品;
      3. 客戶提供材料:新鮮或正確保存的樣品,目的蛋白一抗,陽性對照樣品,相關文獻;

      提交結果 :
      1、預實驗曝光結果(膠片及掃描圖),預實驗采取2個一抗稀釋度; 
      2、正式實驗曝光結果(膠片及掃描圖) ;

      3、完整實驗報告 。


      收費方式:

      蛋白提取費用:50元/樣本,1200元/目的蛋白/膜(8-9個樣本,預實驗,二抗和內參免費,一抗代購或客戶提供,常用抗體我們有備貨,只收取稍許抗體費用)。


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