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非編碼RNA是指不編碼蛋白質(zhì)的RNA，因其異常表達(dá)而與許多疾病發(fā)生密切相關(guān)，在細(xì)菌、真菌、哺乳動物等許多生物體的生命活動中發(fā)揮著極廣泛的調(diào)控作用, 因此受到研究者的重視并成為熱點研究領(lǐng)域。 

非編碼RNA目前主要研究包括長鏈非編碼RNA和微小RNA，長鏈非編碼RNA(Long non-coding RNA, lncRNA)通過多種機(jī)制發(fā)揮其生物學(xué)功能, 這些機(jī)制包括基因印記、染色質(zhì)重塑、細(xì)胞周期調(diào)控、剪接調(diào)控、mRNA 降解和翻譯調(diào)控等。lncRNA 通過這些作用機(jī)制在不同水平進(jìn)行基因表達(dá)調(diào)控；而微小RNA(microRNA，miRNA)是一種長度約21-23nt的非編碼RNA,成熟的miRNA主要作用是對基因轉(zhuǎn)錄后水平進(jìn)行負(fù)向調(diào)節(jié)，通過引起其靶mRNA的降解或翻譯過程的中斷而參與細(xì)胞增殖、凋亡、免疫、神經(jīng)內(nèi)分泌以及干細(xì)胞分化等眾多生命過程?？傊?，它們不再被認(rèn)為是不能編碼蛋白質(zhì)的垃圾RNA，而研究非編碼RNA對了解基因調(diào)控、基因敲除、人類疾病防治及生物進(jìn)化探索等都具有重要意義。 

目前用于非編碼RNA研究的主要方法有轉(zhuǎn)錄組測序、Northern 印跡、實時熒光定量PCR技術(shù)、熒光原位雜交、RNA 干擾和 RNA 結(jié)合蛋白免疫沉淀等，而熒光定量PCR方法作為檢測非編碼RNA表達(dá)的金標(biāo)準(zhǔn)，其應(yīng)用更是廣泛。

關(guān)于microRNA
1.microRNA發(fā)現(xiàn)
   1993年Lee等在秀麗新小桿線蟲內(nèi)首次發(fā)現(xiàn)非編碼蛋白質(zhì)但能時序調(diào)控其胚胎后期發(fā)育基因表達(dá)的小分子RNA:lin-4。2000年Reinhart等在對線蟲的發(fā)育調(diào)控研究中發(fā)現(xiàn)第二種miRNA:Let-7，接著人們相繼在細(xì)菌、果蠅、線蟲、斑馬魚、動植物與人體內(nèi)發(fā)現(xiàn)大量的miRNA編碼基因，進(jìn)一步研究證實MicroRNA主要通過調(diào)控其靶基因mRNA在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控蛋白表達(dá),最新有報道m(xù)icroRNA也能在轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控基因表達(dá)。 

2.microRNA作用機(jī)制
   在細(xì)胞核內(nèi)，由DNA轉(zhuǎn)錄生成pri-pre-microRNA被Drosha酶切割pri-pre-miRNA成形成長度大約70-100堿基的、具發(fā)夾結(jié)構(gòu)的pre-microRNA。該前體RNA經(jīng)核輸出蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞質(zhì)，經(jīng)Dicer酶切割形成成熟的miRNAs。成熟miRNA主要是以RISC（RNA-induced silencing complex）復(fù)合體形式結(jié)合于靶mRNA而發(fā)揮基因表達(dá)調(diào)控作用。 

3.microRNA應(yīng)用與檢測
    由于microRNA在眾多程序的調(diào)控，諸如生物發(fā)育、細(xì)胞增殖和凋亡以及近來被證明與腫瘤發(fā)生相關(guān)等領(lǐng)域發(fā)揮作用，因此其鑒定和定性研究成為迅速發(fā)展的一大研究領(lǐng)域；   

4. microRNA檢測流程--高通量熒光定量PCR法