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      抗體純化

      我公司可為客戶提供多種抗體純化服務(wù): 一、硫酸銨純化 二、Protein A/G純化 三、抗原親和純化

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      制備高特異性、高效價的抗體是實驗免疫學(xué)技術(shù)的基礎(chǔ),抗體質(zhì)量的高低將直接影響試驗的成敗。多克隆血清中含有復(fù)雜多樣的抗體,它不僅含有針對免疫原產(chǎn)生的抗體,還有血清的全部抗體,此外還含有許多自身的血清蛋白。為了獲得成分相對單一的抗體或?qū)⒖贵w用于特定的用途,就需要對抗體進行純化處理。


      純化抗體的用途之一是降低非特異性本底,能去除引起實驗誤差的污染蛋白,且能精確控制實驗中產(chǎn)生陽性信號的抗體量, 因此純化抗體可以作為所有免疫化學(xué)實驗中降低本底的基本手段。另外,使用純化抗體還能進行抗體標(biāo)記(減少有時使用標(biāo)記二抗帶來的干擾),或用于制備免疫親和純化柱等。

      抗體純化的方法包括DEAE離子交換色譜法、硫酸銨沉淀法及其他方法,其中蛋白G或蛋白A親和柱法純化較為簡單、高效,抗原親和柱法純化則能獲得針對抗原的特異性抗體。

      我公司可為客戶提供多種抗體純化服務(wù):

      一、Protein A/G純化

      二、抗原親和純化

      三、硫酸銨純化

      產(chǎn)品名稱

      時間

      Protein A親和純化

      3-5

      Protein G親和純化

      3-5

      IgM型單抗純化

      3-5

      多肽/抗原親和純化

      3-5


      一、抗體純化(ProteinA/G法)

      服務(wù)內(nèi)容:
      1.Protein A/G 純化(≤50 ml)
      2.紫外吸收法測定抗體濃度
      3.純化抗體Elisa

      最終交付的材料:純化后抗體;SDS-PAGE抗體純度鑒定報告;ELISA檢測報告;完整實驗報告。

      樣品要求:抗血清,0.2mg 抗原
      備注:
      1.蛋白A或蛋白G是細(xì)菌胞壁蛋白,它們能結(jié)合抗體Fc段,這一結(jié)合非常牢固,但其親和力對pH的變化敏感,抗體/蛋白A或蛋白G的親和力隨PH值的降低而急劇降低,因而可用于純化不同來源的抗體和抗體亞型。
      2.在抗血清中免疫球蛋白IgG的含量為8-12 mg/ml,只占血清中總蛋白含量的10%左右。蛋白A/G純化抗體的得率大約為5-10 mg總IgG/ml 抗血清;

      二、抗體純化(抗原親和純化法)
      服務(wù)內(nèi)容:
      1.抗原親和純化(≤50 ml)
      2.紫外吸收法測定抗體濃度
      3.純化抗體Elisa

      最終交付的材料:純化后抗體;SDS-PAGE抗體純度鑒定報告;ELISA檢測報告;完整實驗報告。

      樣品要求:抗血清,2-5 mg 抗原
      如果抗原是多肽,須提供多肽2 mg,純度大于80%,若為多肽溶液則濃度須大于2 mg/ml;如果抗原是蛋白,該蛋白在PBS中應(yīng)當(dāng)可溶,須提供蛋白5 mg,純度大于80%,濃度大于0.5 mg/ml

      備注:
      1. 抗原與抗體之間具有高度的親和力和特異性,能夠分離抗特定抗原的特異性抗體,并且具有高收率、高純度、高特異性等優(yōu)點,常用于從多克隆抗體中純化抗原特異性抗體。



      三、抗體純化(硫酸銨沉淀法)

      服務(wù)內(nèi)容:

      1.硫酸銨沉淀法純化血清(≤50 ml)
      2.紫外吸收法測定抗體濃度
      3.純化抗體Elisa

      最終交付的材料:純化后抗體;SDS-PAGE抗體純度鑒定報告;ELISA檢測報告;完整實驗報告。

      樣品要求:抗血清,0.2 mg 抗原
      備注:
      1.飽和硫酸銨可以在偏酸的條件下沉淀血清或者腹水中除 IgG外的蛋白質(zhì), 使上清液中只含有 IgG, 所以該法一般用來純化 IgG1 和 IgG2b, 可用于多種動物血清及小鼠腹水中抗體及單克隆抗體的純化。
      2. 飽和硫酸銨純化抗體的得率大約為10 mg蛋白/1 ml 抗血清;


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