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ELISPOT就其原理來說實在是很簡單的，從本質上說和ELISA的原理是一樣的:細胞受到刺激后局部產(chǎn)生細胞因子，此細胞因子被特異單克隆抗體捕獲。細胞分解后， 被捕獲的細胞因子與生物素標記的二抗結合，其后再與堿性磷酸酶標記的親和素結合。BCIP/NBT底物孵育后，PVDF孔板出現(xiàn)“紫色”的斑點表明細胞產(chǎn)生了細胞因子，通過ELISPOT酶聯(lián)斑點分析系統(tǒng)對斑點的分析后得出結果.

檢測特點：
ELISPOT是定量ELISA技術的延伸和新的發(fā)展，兩者都是檢測細胞產(chǎn)生的細胞因子或其他可溶性蛋白，它們最大的不同在于:
1、ELISA通過顯色反應，在酶標儀上測定吸光度，與標準曲線比較得出定量的可溶性蛋白總量。
2、ELISPOT通過顯色反應，在細胞分泌這種可溶性蛋白的相應位置上顯現(xiàn)清晰可辨的斑點，可直接在顯微鏡下人工計數(shù)斑點或通過ELISPOT分析系統(tǒng)對斑點進行計數(shù)，1個斑點代表1個活性細胞，從而計算出分泌該蛋白或者細胞因子的細胞的頻率。
3、由于是單細胞水平檢測，ELISPOT比ELISA和有限稀釋法等更靈敏，能從 20萬-30萬 細胞中檢出1個分泌該蛋白的細胞。
4、捕獲抗體為高親和力、高特異性、低內(nèi)毒素單抗，在研究者以刺激劑激活細胞時，不會影響活化細胞分泌細胞因子。 

檢測優(yōu)勢：

應用范圍：

客戶提供：
1、盡可能詳細的背景資料。
2、實驗樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等，郵寄前請與我公司技術支持溝通確認。
3、檢測試劑盒（或購買我公司的檢測試劑盒）。

注意事項：
1、客戶收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。
2、對收集后當天進行檢測的標本，儲存在4 ℃?zhèn)溆谩?br /> 3、對因特殊原因需要周期收集的標本，需將標本及時分裝后放在-20 ℃或-70 ℃條件下保存，并避免反復凍融。
4、標本2-8 ℃可保存48小時，-20 ℃可保存1個月。-70 ℃可保存6個月。
5、部分激素類標本需添加抑肽酶。

最終提交結果：

完整的實驗報告單，包括實驗步驟、儀器試劑等信息。