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      GeneGreen(GelGreen)核酸染料

      GeneGreen(GelGreen)核酸染料(10,000×水溶液)?

      產(chǎn)品編號:8101A

      產(chǎn)品規(guī)格:500ul

      產(chǎn)品價格:580

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      儲存條件:C/RT

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      GeneGreen(GelGreen)核酸染料(10,000×水溶液)

      可見光透射儀或紫外透射儀下觀測


      GeneGreen是一種結(jié)合于所有dsDNA雙螺旋小溝區(qū)域的具有獨特涉及的熒光染料。在游離狀態(tài)下側(cè)鏈、CeneGreen發(fā)出微弱的熒光,但一旦與雙鏈DNA結(jié)合后,熒光大大增強,因此CeneGreen的熒光信號強度與雙鏈DNA的數(shù)量相關,可以根據(jù)熒光信號檢測出PCR體系存在的雙鏈DNA數(shù)量。


      產(chǎn)品特點:
      1.無毒性:CeneGreen 獨特的油性和大分子量特點使其不能穿透細胞膜進入細胞內(nèi),艾姆斯氏試驗結(jié)果也表明,該染料的誘變性遠小于EB。
      2.靈敏度高:適用于各種大小片段的電泳染色,對核酸遷移的影響小于SYBR Green I。
      3.穩(wěn)定性高:適用于使用微波或其它加熱方法制備瓊脂糖凝膠;室溫下在酸或堿緩沖液中極其穩(wěn)定,耐光性強。
      4.信噪比高:樣品熒光信號強,背景信號低。 
      5.操作簡單:在預制膠和電泳過程中染料不降解;而電泳后染色過程也只需 30 分鐘且無需脫色或沖洗,即可直接用可見光凝膠透射儀觀察。
      6.適用范圍廣:可選擇電泳前染色(膠染法)或電泳后染色(泡染法);適用于瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠電泳;可用于 dsDNA、ssDNA 或 RNA 染色。 
      7.與標準凝膠成像系統(tǒng)以及可見光激發(fā)的凝膠觀察裝置完美兼容:適用于使用254nm 激發(fā)的紫外凝膠成像系統(tǒng)或可見光激發(fā)的凝膠觀察裝置。

      儲存條件及有效期:    
      4℃避光可保存12個月。

      操作步驟:
      1.膠染法(用法同EB)(推薦方法)
      1.1 制膠時加入CeneGreen 核酸染料。(例如:每50mL 瓊脂糖溶液中加入5μL CeneGreen 10,000× 儲液,以此比例類推)。
      1.2 按照常規(guī)方法進行電泳。
      注意事項:
      1. 此方法染色染料用量相對較少。500 μL染料大約可以做100塊 50mL的膠。
      2. 由于CeneGreen 具有良好的熱穩(wěn)定性,可以在熱的瓊脂糖溶液中直接添加,而不需要等待溶液冷卻。搖晃,振蕩或者翻轉(zhuǎn)以保證染料充分混勻。也可以選擇將CeneGreen 儲液加到瓊脂糖粉末和電泳緩沖液中,然后用微波爐或其他常用方式加熱以制備瓊脂糖凝膠。CeneGreen 兼容所有常用的電泳緩沖溶液。
      3. 如果總是看到條帶彌散或分離不理想,建議使用泡染法染色以確認問題是否與染料有關。如果染色后問題依舊存在,則說明問題與染料無關,請嘗試:降低瓊脂糖濃度;選用更長的凝膠;延長凝膠時間以保證邊緣清晰;改進上樣技巧或選擇泡染法染色。
      4. 此方法不適合預制聚丙烯酰胺凝膠,對于聚丙烯酰胺凝膠請使用泡染法。

      2.泡染法:
      2.1 按照常規(guī)方法進行電泳。 
      2.2 用H2O將CeneGreen 10,000× 儲液稀釋約3,300倍到0.1M NaCl中,制成3× 染色液。(例如將15μL CeneGreen 10,000× 儲液和5mL 1M NaCl加到45mL H2O中)。
      2.3 將凝膠小心地放入合適的容器中,如聚丙烯容器中。緩慢加入足量的3× 染色液浸沒凝膠。室溫振蕩染色30min左右。
      注意事項:
      1.用泡染法染色時,染料用量較多。單次使用的染色液可重復使用3次左右。
      2.3× CeneGreen 染色液可以大量制備,在室溫下避光保存直至用完。

      幾種核酸染料比較:

      名稱

      特性

      安全性

      適用性

      GeneRed/

      GelRed

      靈敏度:

      1.是一種獨特的油性大分子,不易揮發(fā)升華,不易吸入人體,不能穿透細胞膜進入活體細胞內(nèi),安全無毒。

      2.艾姆斯氏測試結(jié)果表明,GeneRed在凝膠染色濃度下完全沒有誘變性,因此完全沒有致癌毒性。

      通用大小片段電泳染色,與EB有相同的光譜特性,無需改變?yōu)V光片及觀察裝置。標準的EB濾光片或SYBR濾光片都適用,使用普通紫外凝膠透射儀觀察即可,在300nm紫外光附近可得到最佳激發(fā)。

      穩(wěn)定性:

      DNA遷移的影響:

      條帶不彎曲,DNA片段不遷移。

      GeneGreen/

      GelGreen

      靈敏度:

      1.是一種獨特的油性大分子,不易揮發(fā)升華,不易吸入人體,不能穿透細胞膜進入活體細胞內(nèi),安全無毒。

      2.艾姆斯氏測試結(jié)果表明,GeneGreen在凝膠染色濃度下完全沒有誘變性,因此完全沒有致癌毒性。

      通用大小片段電泳染色,適用于使用254nm激發(fā)的紫外凝膠透射儀或可見光凝膠透射儀觀察。

      穩(wěn)定性:

      DNA遷移的影響:

      條帶不彎曲,DNA片段不遷移。

      SYBR Green I

      靈敏度:

      屬花菁染料,能透過細胞膜進入活體細胞內(nèi),但容易生物降解,不會在體內(nèi)殘留,安全無毒。

      100bp以上電泳染色,適用于使用254nm激發(fā)的紫外凝膠透射儀或可見光凝膠透射儀觀察。

      穩(wěn)定性:

      染料濃度較高時,條帶容易彎曲,DNA片段遷移的現(xiàn)象明顯。

      EB

      靈敏度:

      1.分子量小,易揮發(fā)升華,易吸入人體,不易生物降解,在體內(nèi)長期殘留。

      2.艾姆斯氏測試結(jié)果表明,EB容易引起有機體突變,是一種強誘變劑,具有高致癌性。

      100bp以上電泳染色,背景熒光信號高;使用普通紫外凝膠透射儀觀察。

      穩(wěn)定性:

      DNA遷移的影響:

      條帶不彎曲,DNA片段不遷移。

      Goldview

      靈敏度:

      1.主要成分為吖啶橙,是一種煤焦油提取物,具有高毒,致癌,高誘變性。

      2.易揮發(fā)升華,易吸入人體,能穿透細胞膜進入活體細胞內(nèi),不易生物降解,在體內(nèi)長期殘留。

      100bp以上電泳染色,背景熒光信號高;適用于使用254nm激發(fā)的紫外凝膠透射儀或可見光凝膠透射儀觀察。

      穩(wěn)定性:

      DNA遷移的影響:

      條帶不彎曲,DNA片段不遷移。


      注意事項及安全提示:
      1.如果您使用的是紫外成像儀,請選擇GeneRed;如果您使用激光成像儀或希望在可見光下觀測,請選擇GeneGreen。
      2.在極少數(shù)情況下,質(zhì)粒經(jīng)某些酶切后的DNA樣品會出現(xiàn)拖尾和分辨率降低,此時建議同時嘗試兩種染色方法以決定哪種方法更加合適。




      藍光照膠儀:

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      Genenode|君諾德公司

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