技術(shù)原理：以SNP分型檢測(cè)為例，在PCR過(guò)程中，兩個(gè)探針能與正向引物和反向引物之間的互補(bǔ)序列特異退火結(jié)合。當(dāng)探針以完整形式存在時(shí)，由于能量共振轉(zhuǎn)移，熒光基團(tuán)只發(fā)出微弱熒光。特異的探針與相應(yīng)的等位基因雜交后，DNA聚合酶發(fā)揮5’外切酶活性，把報(bào)告熒光基團(tuán)切割下來(lái)，從而發(fā)出熒光；而SNP探針的錯(cuò)配形式不會(huì)引起切割，無(wú)熒光信號(hào)。MGB分子結(jié)合到DNA螺旋小溝，通過(guò)穩(wěn)定MGB探針/模板提高雜交穩(wěn)定性，使短至13個(gè)堿基的探針獲得高錯(cuò)配區(qū)分辯別能力。MGB探針包括一個(gè)不發(fā)熒光的淬滅基團(tuán)（NFQ），極大消除傳統(tǒng)淬滅基團(tuán)產(chǎn)生的背景熒光，提高信噪比，從而提高檢驗(yàn)靈敏性。
原理及流程示意圖：
技術(shù)優(yōu)勢(shì)：
1. 采用最先進(jìn)的ABI 7900HT系統(tǒng)采用激光掃描并激活96/384孔板每個(gè)反應(yīng)孔的熒光染料，熒光信號(hào)通過(guò)光柵分光，經(jīng)過(guò)分離的多色熒光同時(shí)到達(dá)CCD攝像機(jī)，實(shí)現(xiàn)多色熒光同時(shí)檢測(cè)。
2. 采用ABI 專利技術(shù)的TaqMan-MGB 探針：MGB探針包括一個(gè)不發(fā)熒光的淬滅基團(tuán)（NFQ），極大消除傳統(tǒng)淬滅基團(tuán)產(chǎn)生的背景熒光，提高信噪比，從而提高檢驗(yàn)靈敏性，另外MGB(小溝結(jié)合物)增加Tm值，使探針設(shè)計(jì)產(chǎn)度縮短至約15bp，提高了探針設(shè)計(jì)的靈活性。
技術(shù)特點(diǎn)：
1. 適合位點(diǎn)少，樣本通量高的檢測(cè)，每個(gè)位點(diǎn)需要合成一對(duì)探針，探針合成費(fèi)用高；
2. 應(yīng)用ABI7900、ABI7500定量PCR儀進(jìn)行定量檢測(cè)；
3. 操作簡(jiǎn)便，只需一步 PCR 反應(yīng)，無(wú)須純化和預(yù)處理，直接上機(jī)檢測(cè)；
4. 結(jié)果清晰，軟件分析結(jié)果界面友好，標(biāo)出每個(gè)樣本的基因型及熒光強(qiáng)度，非常直觀；
適用范圍：特別適合樣本數(shù)量超過(guò)1500個(gè)以上，位點(diǎn)數(shù)量比較少的SNP分型。
訂單點(diǎn)擊下載：SNP基因分型訂單表
客戶需要提供：
1. 細(xì)胞，組織或血液等樣品材料，基因組DNA提取費(fèi)用單獨(dú)收費(fèi)；
2. 基因組DNA（體積≥30μl，濃度≥50 ng/μl），純度 OD260/280 為1.7～1.9之間；
3. 人類基因組需提供SNP位點(diǎn)的RS號(hào)。其它物種如牛、雞、魚等無(wú)rs號(hào)的，需提供SNP位點(diǎn)上下游各200bp的確切序列，SNP位點(diǎn)的突變類型，以及位點(diǎn)的上下游25bp內(nèi)是否存在其它連鎖位點(diǎn)。
最終提交結(jié)果：
1. SNPs結(jié)果（ExceL表格）；
2. 完整實(shí)驗(yàn)報(bào)告：擴(kuò)增和反應(yīng)體系、所涉及的引物、探針序列；
想咨詢了解更多關(guān)于Taqman-MGB探針?lè)⊿NP分型技術(shù)和收費(fèi)，請(qǐng)電話或郵件聯(lián)系我們！
[email protected]， 18518676727
