技術(shù)原理:先通過PCR擴(kuò)增目標(biāo)序列,然后加入SNP序列特異延伸引物,在 SNP位點(diǎn)上,延伸 1個(gè)堿基。將制備的樣品分析物與芯片基質(zhì)共結(jié)晶后在質(zhì)譜儀的真空管經(jīng)強(qiáng)激光激發(fā),核酸分子離解吸附為單電荷離子,電場中離子飛行時(shí)間與離子質(zhì)量成反比,通過檢測核酸分子在真空管中的飛行時(shí)間而獲得樣品分析物的精確分子量,從而檢測出SNP位點(diǎn)信息。
原理及流程示意圖:
技術(shù)優(yōu)勢:
1. 高通量檢測,簡單靈活:采用Sequenom 384芯片平臺(tái),能為受檢樣品設(shè)計(jì)最高可達(dá)30重的PCR反應(yīng),從而通過一次實(shí)驗(yàn)即可獲得每個(gè)樣品多達(dá)30個(gè)SNP位點(diǎn)的多態(tài)性研究數(shù)據(jù),節(jié)省檢測經(jīng)費(fèi),縮短檢測時(shí)間,提高了檢測效率。用戶可以自行定義待測SNP位點(diǎn)和樣品數(shù),每天能夠檢測6張384芯片/臺(tái)儀器,單個(gè)樣品一次最多可檢測30多個(gè)位點(diǎn),位點(diǎn)檢出率≥90%,樣品檢出率>95%,重復(fù)性>98%;
2. 結(jié)果準(zhǔn)確,靈敏度高:結(jié)合單堿基延伸技術(shù),利用質(zhì)譜直接檢測物質(zhì)分子量,MassArray反應(yīng)體系為非雜交依賴性,不存在潛在的雜交錯(cuò)配干擾,也不需要引入各種熒光標(biāo)記物,有效避免由于熒光標(biāo)記效率導(dǎo)致的實(shí)驗(yàn)誤差,實(shí)驗(yàn)檢測結(jié)果準(zhǔn)確,穩(wěn)定性強(qiáng),結(jié)果重復(fù)性好;
適宜范圍:適合中高通量SNP檢測,簡單靈活,結(jié)果準(zhǔn)確,靈敏度高,價(jià)格實(shí)惠;
訂單點(diǎn)擊下載:SNP基因分型訂單表
客戶需要提供:
1. 細(xì)胞,組織或血液等樣品材料,基因組DNA提取費(fèi)用單獨(dú)收費(fèi);
2. 基因組DNA(體積≥30μl,濃度≥50 ng/μl),純度 OD260/280 為1.7~1.9之間;
3. 人類基因組需提供SNP位點(diǎn)的RS號(hào)。其它物種如牛、雞、魚等無rs號(hào)的,需提供SNP位點(diǎn)上下游各200bp的確切序列,SNP位點(diǎn)的突變類型,以及位點(diǎn)的上下游25bp內(nèi)是否存在其它連鎖位點(diǎn)。
最終提交結(jié)果:
1. SNPs結(jié)果(ExceL表格);
2. 完整實(shí)驗(yàn)報(bào)告:擴(kuò)增和反應(yīng)體系、所涉及的引物、探針序列;
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