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病毒基因組DNA提取試劑盒(離心柱型)

Viral DNA Extraction Kit(Column)

包裝規(guī)格：

一.產品介紹：
采用特異性結合病毒DNA 的離心吸附柱和獨特的緩沖液系統(tǒng)，病毒DNA提取試劑盒適合于從無細胞體液，包括血漿、血清、腹水、培養(yǎng)細胞上清液、腦脊髓液及尿液等中快速提取高純的病毒DNA。該產品可以滿足絕大多數的病毒DNA的提取要求， 如病毒DNA：HBV（乙肝病毒）和CMV（巨細胞病毒）等等。病毒裂解后，DNA后在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內硅基質膜，再通過一系列快速的漂洗－離心的步驟，將鹽、細胞代謝物、蛋白等雜質去除，最后低鹽的洗脫緩沖液將純凈的病毒DNA從硅基質膜上洗脫。純化后的病毒核酸無雜質和PCR抑制劑，可直接適用于PCR、酶切、雜交等分析。

二.產品特點：
1.不需要使用有毒的苯酚等試劑，也不需要乙醇沉淀等步驟。
2.節(jié)省時間，簡捷，單個樣品操作一般可在20分鐘內完成。
3.多次柱漂洗確保高純度，提取的病毒DNA 純度高，質量穩(wěn)定可靠，可適用于各種操作，包括PCR、酶切、雜交等。

三.操作步驟：（實驗前請先閱讀注意事項）
提示：第一次使用前請先在15ml漂洗液WB中加入60ml無水乙醇，充分混勻，加入后請及時在方框打鉤標記已加入乙醇，以免多次加入!

1.200μl血清等體液（需回復到室溫，不足可用0.9% NaCl或者PBS補足）轉入上述1.5ml離心管，加入400μl 裂解液DLB, 立刻渦旋振蕩充分混勻。

2.室溫(15-25℃)放置10分鐘，每隔5分鐘，振蕩混勻一次。

3.加入450μl無水乙醇，立刻渦旋振蕩充分混勻。
如果周圍環(huán)境高于25℃,乙醇需要冰上預冷后再加入。

4.將上述混合物加入一個吸附柱AC中，（吸附柱放入收集管中）13,000rpm離心30-60秒，倒掉收集管中的廢液。
如果總體積超過750μl，可分兩次將溶液加入同一個吸附柱AC中。

5.加500μl去蛋白液RE，12,000rpm離心30秒，棄廢液。

6.加入500μl漂洗液WB（請先檢查是否已加入無水乙醇!），12,000rpm 離心30秒，棄廢液，加入500μl漂洗液WB，重復一遍。

7.將吸附柱AC放回空收集管中，13,000rpm離心2分鐘，盡量除去漂洗液， 以免漂洗液中殘留乙醇抑制下游反應。

8.取出吸附柱AC，放入一個新的離心管中，在吸附膜的中間部位加30-50μl 洗脫緩沖液EB（事先在 65－70℃水浴中加熱效果更好）， 室溫放置1分鐘，12,000rpm 離心1分鐘。如果想得到較多量的DNA，可將得到的溶液重新加入離心吸附柱中，12,000rpm離心1分鐘。
洗脫體積越大，洗脫效率越高。如果需要DNA濃度較高，可以適當減少洗脫體積， 但是最小體積不應少于20μl，體積過小降低洗脫效率，減少DNA產量。

9.DNA可以存放在2-8℃，如果要較長時間存放，可以放置在－20℃。