技術(shù)服務(wù)

MicroRNA（miRNA）是一類(lèi)長(zhǎng)度約19-24nt的非編碼單鏈RNA，通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)的方式與靶基因的3’-UTR區(qū)部分或完全互補(bǔ)，剪切靶基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物或者抑制轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的翻譯，從而起到轉(zhuǎn)錄后調(diào)控靶基因表達(dá)的作用。它廣泛存在于動(dòng)物、植物、真菌及病毒的基因組中，調(diào)控生物體生長(zhǎng)發(fā)育和疾病發(fā)生等過(guò)程中相關(guān)基因的表達(dá)。MiRNA的異常表達(dá)可能會(huì)導(dǎo)致生理狀態(tài)的異常和疾病的產(chǎn)生，在多種癌癥中，miRNA的表達(dá)水平會(huì)發(fā)生明顯改變，有可能起到原癌基因和抑癌基因的作用。此外，在許多其他的病變組織和細(xì)胞中也檢測(cè)到了miRNA的異常表達(dá)。因此對(duì)miRNA的表達(dá)的研究具有重要意義。

服務(wù)項(xiàng)目
1．MicroRNA的實(shí)時(shí)定量PCR（Real-time quantitative PCR）檢測(cè)運(yùn)用成熟的實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)準(zhǔn)確、快速地定量檢測(cè)各種組織、原代細(xì)胞及細(xì)胞系中目的microRNA的表達(dá)情況，具有靈敏度高、實(shí)驗(yàn)周期短和特異性高等特點(diǎn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)圖1和圖2。

2．MicroRNA Array
利用集成在384孔板上的引物和探針組合來(lái)檢測(cè)人類(lèi)、大鼠或小鼠的miRNA表達(dá)譜，只需1個(gè)工作日就能產(chǎn)生覆蓋Sanger miRBase的綜合數(shù)據(jù)集。采用TaqMan探針原理，結(jié)果準(zhǔn)確可靠，樣品無(wú)需做重復(fù)試驗(yàn)。
 
3．特定類(lèi)型疾病miRNA表達(dá)檢測(cè)
MiRNA的表達(dá)檢測(cè)對(duì)監(jiān)測(cè)腫瘤的發(fā)生發(fā)展和各種治療手段的效果有重要意義，作為指導(dǎo)個(gè)體化藥物選擇的生物標(biāo)記具有很大的臨床應(yīng)用潛力。我們針對(duì)肝癌、胃癌、胰腺癌等多種腫瘤相關(guān)標(biāo)志性miRNA進(jìn)行熒光定量檢測(cè)。

實(shí)驗(yàn)步驟：
1.設(shè)計(jì)合成引物或Taqman探針
2.總RNA提取和質(zhì)檢
3.反轉(zhuǎn)錄
4.qPCR檢測(cè)
5.數(shù)據(jù)分析

送樣要求：
細(xì)胞（≥106）、組織（≥300mg）、血液（≥1ml）、血清（≥1.5ml）等樣品材料，總RNA（≥20μl，濃度≥ 50ng/μl）。 同時(shí)提供待測(cè)基因序列或基因名稱(chēng)。

提交的結(jié)果：
引物（或探針）及序列、反轉(zhuǎn)錄膠圖、原始qRT-PCR數(shù)據(jù)和實(shí)驗(yàn)報(bào)告。